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phageコミュのファージでcDNAライブラリを発現

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ファージでcDNAライブラリを発現

mixiユーザー 2005年12月04日 11:17

はじめまして。現在、ファージを用いてドラッグデザインを試みているkama-chanといいます。どうぞよろしく。
さて、タイトルに書かせてもらいましたが、cDNAライブラリをファージの外殻に発現させたいと考えています。
M13 filamentous phageに発現させたいのですが、ファージミドベクター（g6p系）を扱ったヒト、さらにベクターを持っているヒト、ってご存じですか？T7系のヒトでも、情報をいただければありがたいです。どうぞよろしくお願い致します。

コメント(7)

[2] mixiユーザー 12月04日 23:13

アーリー（Hey）さん
ご連絡ありがとうございました。
厚かましいお願いですが、なにかありましたら是非情報をいただければ幸いです。期待しつつお待ち申し上げております。

[3] mixiユーザー 12月05日 17:23

私達はT7ファージを用いてスクリーニングを行っています。
ファージライブラリーは自分たちで構築しています。

[4] mixiユーザー 12月05日 18:29

tokkohさん
お返事ありがとうございました。
T7系でcDNAを発現させたことがある、として理解してよろしいでしょうか？そのときにORFだけ効率よく提示できる良い方法をご存じであれば是非教えて頂きたく思います。
どうぞよろしくお願いいたします。

[5] mixiユーザー 12月15日 14:24

現在、私も新たなｃDNAの発現を行っています。
ORFだけを効率よく提示させるような工夫はしていません。
キットのマニュアルにあるようにランダムプライマーで逆転写してから組み込んでいます。

[7] mixiユーザー 12月19日 10:12

tokkohさん、アーリー（Hey）さん

情報、ありがとうございました。
返事が遅れて、申し訳ない、、。
こちらでも独自に調査した結果、ORFを集める方法（といっても、完全長ではないですが）を探索し、それなりの方法である可能性がでてきました。まだ実験は開始していませんが、もしかしたらいい方法になり得るかもしれません。
そのときにはまた報告させて頂きます。どうもありがとうございました。

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