phageコミュの一般的にファージの保存性は？

下に、似たような質問があるようですが

アユの病原菌のファージを研究しています。初心者というか、門外者です、よろしくお願いします。

ファージを培地の中で冷暗保存しています。PFUのチェックをしましたが、かなり長期でも、あまり落ちていませんでした。別のファージでもチェックをしようと思っています。

そこで専門家の皆様に質問なのですが、一般的にはファージはどんなバッファーの中で保存するのが最も望ましいのでしょうか？教えてください。

また、よく目にするSMバッファーとはどんなものでどうやって作るのでしょうか？PBSの場合、人間用じゃなくて、魚に合わすのでしょうか？（濃度）

コメント(8)

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[1] mixiユーザー 03月03日 20:49

ファージによって最適条件が違うので一般的バッファーというのはありません。アユの病原菌に感染するファージなら水中で安定でしょうから、ブイヨンでかまわないと思います。

ＳＭバッファーは教科書を読んでください。

ＰＢＳは、ＰＢＳでヒト用もサカナ用もありません（と思いますけど、サカナやってる人たちの間では違うの？）。

ブイヨンもＳＭバッファー、ＰＢＳも棚に滅菌したのが置いてあったから使っただけ、でも論文には何使ったか書かないといけないので書いたということが多いと思います。

[2] mixiユーザー 03月03日 21:05

すみません、最初に書いたように、門外の人間ですので、教科書も持っていません。自分で研究したことと、ネットで得た知識、この関連で知り合った教授から教えていただいたことだけが手がかりでやっております。友達の医者に聞いては本を買ったりしておりますが、彼はこの専門ではないので、的確なアドバイスはありません。ちなみに、研究施設もあちこちからももらいものと自費での研究室ですので、とても貧弱です。プロの方が見たら笑うかもしれません。

ブイヨン中での保存ですか・・・・どうも回答ありがとうございました。

ちなみに、飼料中にしみこませてみたところ、思ったよりも長期にタイターの低下はありませんでした。滅菌水でもある程度安定でした。

[3] mixiユーザー 03月03日 21:23

PBSを
検索しましたら、phosphate buffered saline　と書かれてありました。燐酸緩衝食塩水ということですので、動物の種類によって濃度が違うと理解しているのですが、間違っているのでしょうか？
違っておりましたら、ご指摘ください。

[4] mixiユーザー 03月03日 22:03

孔明さん、東京タワーの近くまでこれるなら本貸しますよ。

あとバッファー類の組成は試薬屋さんのカタログに載ってます。で、ＰＢＳはどのメーカーもほぼ同じ組成です。本当はDulbecco's PBSの組成なんですけど、ＰＢＳと言ったらこれのことだと思う人が多いと思います。ＰＢＳは雑菌がはえるので保存用には適していません。

SM buffer
NaCl 0.58 g
MgSO4･7H2O 0.2 g
1M Tris･Cl (pH7.5) 5 mL
2% Gelatin 0.5 mL
H2O 95 mL

[5] mixiユーザー 03月04日 09:46

ICEさん、何度もご回答ありがとうございます。
今は何でも売っている時代なのですね。
近所の培地屋さんを探して、総合的なカタログをもらえるようにします。

畑中正一編集ウイスル学（朝倉書店）という本で勉強しています。他にお勧めの書籍がありましたら、これはという一冊をご紹介ください。

[6] mixiユーザー 03月06日 10:58

Cold Spring Harbor Laboratory Press の Molecular Cloning: A Laboratory Manual のλファージ関係はファージ精製の参考になります。分子生物学をやってる研究室ならあるはずです。ファージの所だけメモしてください。買うのなら、新しいのは３分冊で高いから、初版か２版を古本で入手する方が良いです。

あとは
バクテリオファージの実験　富沢純一著　岩波書店１９７０年
バクテリオファージ－その分子生物学－ GSステント著　岩波書店１９７２年

[7] mixiユーザー 03月06日 11:12

昔のことの方が良く覚えているのを自覚しましたが、昔のことを思い出したら最近のことも思い出しました。

BACTERIOPHAGES biology and Applications. Elizabeth Kutter and Alexander Sulakvelidze Eds. CRC Press 2005

こちらは Phage Ecology から Phage Therapy まで書いてあります。

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