病理学コミュのHE染色でミスしてしまいました

今月から病理検査室に移動になった者です。
ＨE染色をする際に脱パラ→流水水洗・蒸留水水洗→ヘマトキシリンを飛ばしてエオジンに1分くらい入れてしまいました。
気がついてすぐに流水水洗をしました。
流水水洗を2、3分した後に蒸留水水洗をせずにヘマトキシリンに入れたしまいました

このような場合標本の染め上がりに大きく影響が出てしまうのでしょうか？
また、水道水が混入してしまったヘマトキシリンには何かしらの変化が生じて使用不可能となってしまうのでしょうか？

コメント(7)

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[1] mixiユーザー 02月04日 22:22

脱パラをも飛ばしてエオジンですか…
そもそもエオジンに染まりましたか？

その後、ヘマトキシリンに入れたとの事ですが、脱パラしていない以上は染まらないのではないでしょうか？

[2] mixiユーザー 02月04日 22:26

水道水のまじったヘマトキシリンですが、臨床系ではわかりませんが、基礎系研究では(うちでは)あまり気にせず使ってしまっています。
(本当は良くないのなか…とは思いますが)

[3] mixiユーザー 02月05日 01:22

＞ひろぽんさん
文章の書き方が悪かったみたいですみません。

脱パラと水洗はしました。ヘマトキシリンに入れる段階で間違ってエオジンに入れてしまったのです・・・。なので、標本は赤く染まっていました

すぐに水洗してある程度色は落ちたのですが、顕鏡したら赤血球はしっかり染まってしまっていました。

ヘマトキシリンについては、ＰＨが微妙に変わってくるとか、劣化が早まると言われたのですが実際にその様な事があるのでしょうか？
私にその様に言った方も特に根拠があって言った訳でもなくて、あくまで自分の推測なのだそうです。

[4] mixiユーザー 02月05日 06:29

病院で毎日HE染色(市販2倍カラッチ液)を200枚前後機械染めしていますが、蒸留水は使っていません。
PHの影響は、脱灰標本で核のヘマトキシリンの染まりが悪くなるのはよく知られている事ですが、ヘマトキシリン液自体の劣化を明らかにわかるほど早めるような影響は出ないのでエオジンを先に染めて脱色した切片を一回入れたくらいで明らかな劣化が起きるとは思えません。

あと赤血球は無核なので、エオジンで染まって困る事はないと思いますが？

[5] mixiユーザー 02月05日 11:44

ichimi3(=√-1)♂さん

コメントありがとうございます。

皆さん水道水と蒸留水についてはあまり問題視していない様子ですね。
赤血球については、「エオジンに染まりやすくて脱色されにくいから普段の標本よりも濃染された標本になってしまう！」と出来上がりの染まり具合にバラつきが出てしまうことを指摘されました。
「病理検査室のクオリティーが下がる」と注意を受け、みんなに迷惑をかけてしまいました

[6] mixiユーザー 02月06日 08:30

>ＨE染色をする際に脱パラ→流水水洗・蒸留水水洗→ヘマトキシリンを飛ばしてエオジンに1分くらい入れてしまいました。
>気がついてすぐに流水水洗をしました。

正解は、この後自分で何かするのではなく、指導者に相談する、だったと思います。

でっ劣化ですが、もう十何年前ですが検討したことがあって、そのときは、蒸留水を通さなかったほうが劣化が早かったです。
症状は
・ヘマトの染色時間が長くなる
・コントラストが悪くなる（ぼやぁと染まる）
だったような。

ただ、ペーパーにしたわけではないし、そうとう時間が経過しているので資料も残っていないし、ということで記憶だけでエビデンスはありません。

今回の場合について言えば、そもそもドーゼのヘマトの量と、それに対して何枚水道水から直接戻したのか、水道水の持込量はどれくらいか、というあたりがパラメーターになってくるので一概に論じることはできませんが、経験的に言えば、まぁ気にするような影響はないだろうなぁと想像されます。

>「エオジンに染まりやすくて脱色されにくいから普段の標本よりも濃染された標本になってしまう！」

これも、若い頃はわたしもそのように思っていましたが、ほんとうにそうでしょうかね？

[7] mixiユーザー 02月06日 18:42

＞ふみさん
コメントありがとうございます。

ヘマトキシリンの検討をされたことがあるとの事で、大変参考になりました。
皆さんの話を聞いてそれほど影響はないという事がわかり、少しほっとしました。
ですが、うちの施設では蒸留水を使用することが決まりなのでこれからはこのようなミスをしないように気を付けたいと思います。
本当にありがとうございました。

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